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島津應(yīng)用：哺乳動物的細胞培養(yǎng)上清液的LC/MS/MS同時分
閱讀：2157 發(fā)布時間：2016-12-14
生產(chǎn)生物燃料或生物制藥的工業(yè)發(fā)酵需要常規(guī)監(jiān)測介質(zhì)條件， 如 pH、溶解氣體、碳源（葡萄糖）和氮源（谷氨酰胺）等，從而優(yōu)化及控制發(fā)酵過程。然而除上述因素外，培養(yǎng)基中還包含其他一些重要生物成分如維生素、核酸和其他主要代謝物，如果一起監(jiān)控，可以得到更多有關(guān)生物過程技術(shù)的詳細信息。為滿足全面分析培養(yǎng)基成分的需求，我們優(yōu)化了分析條件，開發(fā)出“細胞培養(yǎng)分析方法包”，該方法包可以監(jiān)控下面列出的95種化合物的相對豐度。使用這個方法包，我們研究在雜交癌細胞一周期5天內(nèi)生長過程中培養(yǎng)基成分的豐度變化。
結(jié)果表明，主要的碳源和氮源即葡萄糖、谷氨酰胺以及幾種氨基酸隨著細胞生長信號強度逐漸減弱。因為消耗葡萄糖，所以分泌的代謝物乳酸隨著培養(yǎng)時間的延長信號逐漸增強。觀察其他幾種化合物也表現(xiàn)為類似模式的增強。必需氨基酸和幾種維生素的強度并不隨著培養(yǎng)時間的延長而發(fā)生變化。
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