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　　高純硅膠色譜柱是在新型的更高惰性硅膠基質(zhì)上鍵合通用性的十八烷基官的色譜柱，由于其高惰性，大幅度提高了分析的精度和重現(xiàn)性。它可以用于分離離子化的化合物而不易引起吸附，因此能夠得到非常尖銳的峰形和優(yōu)異的重現(xiàn)性。

 

　　高純硅膠色譜柱的基本原理是樣品在兩相之間的分配，即在固相（吸附劑）和液相（溶劑）之間的分配。保留或洗脫的機(jī)制取決于被分析物與吸附劑表面的活性基團(tuán)，以及被分析物與液相之間的分子作用力。其洗脫模式有兩種：一種是目標(biāo)化合物比干擾物與吸附劑之間的親和力更強(qiáng)，因而被保留，洗脫時(shí)采用對目標(biāo)化合物親和力更強(qiáng)的溶劑；另一種是干擾物比目標(biāo)化合物與吸附劑之間的親和力更強(qiáng)，則目標(biāo)化合物被直接的洗脫。通常采用前一種洗脫方式。

 

　　要有效地利用離子交換機(jī)理將目標(biāo)化合物吸附在高純硅膠色譜柱上，必須滿足以下條件：

 

　　1、目標(biāo)化合物離子與吸附劑官能團(tuán)的離子態(tài)帶相反電荷；

 

　　2、萃取環(huán)境的pH必須同時(shí)使目標(biāo)化合物和吸附劑上的官能團(tuán)帶電荷；

 

　　3、萃取環(huán)境不能含有高濃度的帶有和目標(biāo)化合物相同電荷的競爭化合物。

 

　　在實(shí)際操作中，為了滿足前兩個條件，確保目標(biāo)化合物及吸附劑上的官能團(tuán)能夠呈離子態(tài)或呈中性狀態(tài)，應(yīng)該根據(jù)目標(biāo)化合物及吸附劑官能團(tuán)的pKa來調(diào)節(jié)樣品或色譜柱的pH。在pH2~12范圍內(nèi)呈現(xiàn)出較高的化學(xué)穩(wěn)定性，使其可以在堿性條件下被使用。較寬的pH范圍還可以使用多堿性化合物在非帶電形式下得到分析，減少了二次相互作用發(fā)生進(jìn)而改善分析峰形。由于二次相互作用的降低，大大改善了對肽和蛋白質(zhì)的回收。